價(jià) 格：詢(xún)價(jià)
規(guī) 格：25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L
產(chǎn) 地：中國(guó)
貨 號(hào)：HQ220325001L
品 牌：匯研生物
為確保產(chǎn)品的性能和無(wú)憂的操作，使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本手冊(cè)，有任何疑問(wèn)請(qǐng)咨詢(xún)本公司售后技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N(xiāo)售人員（聯(lián)系方式見(jiàn)附錄）。
1.產(chǎn)品介紹
PS Focurose HPL是一種特定的親和填料，適用于部分病毒、病毒樣顆粒以及某些特定的抗原和蛋白（見(jiàn)表2）的分離純化。
特點(diǎn)：
a.快速、簡(jiǎn)單（一步純化）。
b.載量高。
c.易于放大。
表1：性能參數(shù)
介質(zhì) | PS Focurose HPL |
基質(zhì) | 高剛性瓊脂糖 |
粒徑范圍 | 45-165μm |
平均粒徑 | 90±5μm |
溶菌酶載量 | ≥3mg/ml介質(zhì) |
pH穩(wěn)定性 | 5-12（長(zhǎng)期） 5-12（短期） |
操作壓力 | ≤0.3MPa |
流速 | ≧300cm/h |
貯存溶液 | 20%乙醇 |
貯存溫度 | 4-30℃ |
表2：PS Focurose HPL適用性
Viruses | Viral/Microbial Agents |
Rabies Influenza Japanese Enchephalitis Feline Leukemia Feline Herpes Feline Calicivirus Respiratory Syncytial Virus Human Herpes Simplex Human Measles Human Parainfluenza | Herpes Simplex gA and gB Glycoprotein Subunits Hepatitis B Surface Antigen Filamentous Hemagglutinin from B. pertussis Leucocytosis Promoting Factor Hemagglutinin |
2.溶液配制
平衡液：0.01M PB，調(diào)節(jié)pH 7.2，4-8℃保存。
洗脫液：0.01M PB、1.0M NaCl，調(diào)節(jié)pH 7.2，室溫保存。
備注：平衡液pH為7.2±0.2，在平衡液中可經(jīng)添加0.1M NaCl抑制少量雜質(zhì)的吸附,取決樣品特性；洗脫時(shí)可以把NaCl可增加到2M來(lái)提高洗脫能力。
3.樣品的制備
a.樣品所在溶液鹽的組分及pH必須和平衡液保持一致，可以通過(guò)用平衡液稀釋或透析、超濾、G25進(jìn)行緩沖液置換處理。
b.樣品過(guò)濾（粒徑≤45μm用0.22μm過(guò)濾、粒徑≤165μm用0.45μm過(guò)濾、粒徑≤300μm用0.8μm過(guò)濾，避免堵塞離子交換介質(zhì)）。
備注：不建議直接用強(qiáng)酸或強(qiáng)堿調(diào)整樣品溶液的pH，可能會(huì)出現(xiàn)目標(biāo)物的降解和失活。
4.純化流程（以XK16/10為例）
4.1用純化水以5ml/min沖洗5CV。
4.2用平衡液以5ml/min沖洗10CV。
4.3將樣品以2.5ml/min上樣，上樣完成后用平衡液進(jìn)行清洗直至基線平穩(wěn)。
4.4用洗脫液以5ml/min洗脫10CV，并收集洗脫液。
4.5用純化水以5ml/min沖洗5CV。
4.6用保存液以5ml/min沖洗后保存。
5.清洗（以XK16/10為例）
清洗后可以去除一些強(qiáng)結(jié)合性物質(zhì)（例如一些強(qiáng)結(jié)合的蛋白、變性蛋白、脂類(lèi)等），從而達(dá)到恢復(fù)介質(zhì)的優(yōu)良性能（例如載量、流動(dòng)性、柱效等）。
建議每使用5-10次后進(jìn)行一次清洗，具體清洗頻率需根據(jù)純化的初始樣品的潔凈度進(jìn)行調(diào)整。
5.1用3M NaCl以1ml/min的流速?zèng)_洗10CV。
5.2用0.1M NaOH以1ml/min的流速?zèng)_洗20CV。
5.3用3M NaCl以1ml/min的流速?zèng)_洗10CV。
5.4用純化水以5ml/min的流速?zèng)_洗10CV。
5.5用保存液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV。
6.常見(jiàn)問(wèn)題
表3：常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案
問(wèn)題 | 可能原因 | 解決方案 |
純化時(shí)目標(biāo)物不與介質(zhì)結(jié)合 或結(jié)合量較低 | 1.上樣量過(guò)載 | 降低上樣量 |
2.上樣流速過(guò)快 | 降低上樣流速 | |
3.蛋白或脂類(lèi)在介質(zhì)中聚集 | 及時(shí)有效地清洗介質(zhì)或更換新的介質(zhì) | |
4.目標(biāo)物不帶電或與介質(zhì)帶同樣的電荷 | 篩選合適的結(jié)合緩沖液 | |
5.樣本或平衡液中鹽濃度和pH不正確 | 檢查樣品和平衡液中的電導(dǎo)和pH | |
6.選用了錯(cuò)誤的緩沖液 | 參考緩沖液選擇表 | |
7.樣品中加入了不合適的去污劑 | 檢查樣品中是否有不合適的去污劑 | |
洗脫時(shí)沒(méi)有收集到目標(biāo)物 或只收集到少量目標(biāo)物 | 1.目標(biāo)物沒(méi)有與介質(zhì)結(jié)合或結(jié)合量較少 | 先確認(rèn)目標(biāo)物是否與介質(zhì)結(jié)合 |
2.洗脫條件不合適 | 洗脫液洗脫能力不夠，加大鹽濃度和調(diào)整洗脫液pH | |
3.洗脫時(shí)間不夠 | 降低流速，延長(zhǎng)洗脫液的保留時(shí)間 | |
4.洗脫體積過(guò)小 | 加大洗脫體積 | |
5.目標(biāo)物在洗脫液條件下出現(xiàn)聚集沉淀 | 檢測(cè)目標(biāo)物在洗脫液條件（鹽濃度和pH）下的溶解度和穩(wěn)定性。 | |
目標(biāo)物純度較低
| 1.樣品沒(méi)有經(jīng)過(guò)前處理 | 樣品上柱前必須要經(jīng)過(guò)離心或過(guò)濾 |
2.樣品粘度過(guò)高 | 用平衡液適當(dāng)?shù)南♂寴悠?，降低粘度?/span> | |
3.洗雜不徹底 | 加大洗雜體積直至基線平穩(wěn)并與平衡液一致 | |
4.雜質(zhì)蛋白或脂類(lèi)在介質(zhì)中聚集沉淀 | 及時(shí)有效地清洗介質(zhì) | |
5.洗脫條件不佳 | 優(yōu)化洗脫條件 | |
6.目標(biāo)物出現(xiàn)降解 | 檢測(cè)目標(biāo)物的穩(wěn)定性 | |
7.柱料裝填效果不佳 | 重新裝填或購(gòu)買(mǎi) | |
8.分離柱頂部有較大儲(chǔ)樣體積 | 重新裝柱或降低儲(chǔ)樣體積 | |
9.介質(zhì)中有微生物生長(zhǎng) | 介質(zhì)使用完后，請(qǐng)及時(shí)正確保存介質(zhì) | |
介質(zhì)載量下降 | 1.上樣流速過(guò)快 | 降低上樣流速 |
2.蛋白或脂類(lèi)在介質(zhì)中聚集，導(dǎo)致載量下降。 | 及時(shí)清洗介質(zhì) | |
3.使用次數(shù)過(guò)多，配基被氧化或脫落 | 及時(shí)清洗介質(zhì)或更換新介質(zhì) | |
色譜峰上升過(guò)陡 | 介質(zhì)裝填過(guò)緊 | 重新裝柱 |
色譜峰上升過(guò)緩或拖尾 | 介質(zhì)裝填太松 | 重新裝柱 |
柱床有裂縫或干涸 | 出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入 | 檢查管路是否有泄露或氣泡，重新裝柱 |
液流較慢 | 1.蛋白或脂類(lèi)聚集 | 及時(shí)清洗介質(zhì)或?yàn)V膜 |
2.蛋白沉淀在介質(zhì)中 | 調(diào)整平衡液和洗脫液組分，以維持目標(biāo)物的穩(wěn)定性和介質(zhì)的結(jié)合效率 | |
3.分離柱中微生物生長(zhǎng) | 所用試劑必須經(jīng)過(guò)過(guò)濾和脫氣； 樣品上柱前必須離心或過(guò)濾 |
7.訂購(gòu)信息
表4：訂購(gòu)信息表
產(chǎn)品 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
PS Focurose HPL | 25ml | HQ220325025M |
PS Focurose HPL | 100ml | HQ220325100M |
PS Focurose HPL | 500ml | HQ220325500M |
PS Focurose HPL | 1L | HQ220325001L |
PS Focurose HPL | 5L | HQ220325005L |
PS Focurose HPL | 20L | HQ220325020L |
備注：大規(guī)格包裝產(chǎn)品或其它產(chǎn)品購(gòu)買(mǎi)，請(qǐng)咨詢(xún)本公司當(dāng)?shù)劁N(xiāo)售或售前技術(shù)支持。
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