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產(chǎn)品展示

Focurose 6FF

價 格:詢價

規(guī) 格:5ml/25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地:中國

貨 號:HN060307001L

品 牌:匯研生物


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產(chǎn)品概述

   為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作,使用前請仔細閱讀本手冊,有任何疑問請咨詢本公司售后技術(shù)支持或當?shù)氐匿N售人員(聯(lián)系方式見附錄)。

 

1.產(chǎn)品介紹

Focurose 6FF適用于生物大分子物質(zhì)的組分分離和中度純化(去除小分子雜質(zhì)),例如:病毒顆粒、大分子蛋白、超螺旋DNA、多糖及大分子復(fù)合物。

特點:

a.高(理化)穩(wěn)定性、高流速(組分分離)、高回收率(可高達95%)。

b.溫和的洗脫條件可以完整的保留生物大分子生物學(xué)活性和功能。

c.易于放大。

d.易于維護。

 

表1:性能參數(shù)

介質(zhì)

高度交聯(lián)6%的瓊脂糖

粒徑范圍

45-165μm

平均粒徑

90±5μm

分離范圍(球蛋白)

10-4000kDa

pH穩(wěn)定性

2-12(長期) 2-14(短期)

化學(xué)穩(wěn)定性

2M氫氧化鈉、70%乙醇、30%異丙醇、30%乙腈、1%SDS、6M鹽酸胍、8M尿素

流速

300-700cm/h

最大壓力

0.3MPa

高溫高壓

水中121℃×20min

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-30℃

 

2.溶液制備

洗脫液:根據(jù)客戶需求進行配制。

備注:建議在目標溶液中加入一定濃度的鹽(至少0.025 M)用來抑制樣本和介質(zhì)的離子作用。

 

3.樣品制備

3.1濃縮樣品上樣前過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過濾)。

 

4.純化流程(以裝填XK 16/70的柱子為例 )

4.1清洗

取140g的沉降介質(zhì),加入3倍體積的純化水重懸后用G3砂芯漏斗抽干,重復(fù)此步驟兩次。

4.2勻漿

將清洗完的抽干的介質(zhì)用相同體積(≈140ml)的純化水進行重懸,用玻璃棒緩慢攪拌均勻。

4.3準備柱子

a.將柱管、下柱頭、適配器以及裝柱器用純化水沖洗干凈;

b.安裝下柱頭后擰緊密封圈;

c.注入3-5cm高的純化水;

d.擰下下堵頭,待排出所有氣泡后再擰上下堵頭;

e.安裝裝柱器,將層析柱垂直固定在層析系統(tǒng)附近。

4.4脫氣

   將勻漿后的介質(zhì)用真空泵或超聲清洗裝置進行脫氣。

4.5裝柱

a. 將脫氣后的介質(zhì)用玻璃棒或其它攪拌裝置溫和攪拌均勻后,快速、連續(xù)加入(用玻璃棒引流,避免引入氣       泡)到層析柱中。

b. 快速用純化水將裝柱器上端填滿,并裝上裝柱器蓋。

c. 用管路連接層析系統(tǒng)和裝柱器后,擰下下堵頭,以3ml/min(90cm/h)的流速壓柱120min后暫停層析系統(tǒng)。

d. 擰上下堵頭,快速取下裝柱器,用純化水填滿柱管。

e. 將適配器連接層析系統(tǒng),待管路中氣泡排盡后,將適配器稍微傾斜后插入柱管至介質(zhì)界面上端0.5-1cm,擰緊密封圈。

f. 擰下下堵頭,以6ml/min(180cm/h)的流速壓柱30min后停止層析系統(tǒng)。

g. 標記介質(zhì)界面刻度,將適配器壓至介質(zhì)界面以下0.3cm。

4.6柱效檢測

a. 連接層析柱出口至層析系統(tǒng),用純化水以1ml/min(30cm/h)的流速平衡2CV(柱體積);

b. 用定量環(huán)或上樣泵注入1%CV的2%丙酮;

c. 以1ml/min(30cm/h)的流速運行1.5CV;

d. 計算HETP和As,HETP≤3h(h為平均粒徑)且0.7≤As≤1.3方為合格,否則重裝。

4.7使用

      若柱效檢測合格可立即使用,以1ml/min(30cm/min)的流速用平衡液(平衡液中加入0.15M氯化鈉,抑制可能存在的非特異性吸附)平衡2CV后進行進樣(建議上樣體積≤2.5%CV)分離;若柱效檢測合格后,以1ml/min(30cm/min)的流速用保存液平衡2CV后保存。

 

5.清洗(以裝填XK 16/70的柱子為例 )

5.1 用純化水以1ml/min(30cm/h)沖洗2個CV。

5.2  用1.0M NaOH以1ml/min(30cm/h)的流速沖洗2個CV。

5.3 用純化水以1ml/min(30cm/h)的流速沖洗2個CV。

5.4 用1.0M 乙酸以1ml/min(30cm/h)的流速沖洗2個CV。。

5.5 用純化水以1ml/min(30cm/h)的流速沖洗2個CV。

5.6 用70%乙醇以1ml/min(30cm/h)的流速沖洗2個CV。

5.7 用純化水以1ml/min(30cm/h)的流速沖洗2個CV。

5.8 用20%乙醇以1ml/min(30cm/h)的流速沖洗2個CV。

 

6.消毒

6.1 用純化水以1ml/min(30cm/h)沖洗2個CV。

6.2 用1.0M NaOH以1ml/min(30cm/h)的流速反向沖洗2個CV。

6.3 用純化水以1ml/min(30cm/h)的流速沖洗2個CV。

6.4 用20%乙醇以1ml/min(30cm/h)的流速沖洗2個CV。

 

7.常見問題

表2:常見問題及解決方案

問題

可能原因

解決方法

色譜峰上升過陡

介質(zhì)裝填過緊

重新裝柱

色譜峰上升過緩或拖尾

介質(zhì)裝填太松

重新裝柱

柱床有裂縫或干涸

出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入

檢查管路是否有泄露或氣泡,重新裝柱

分離度差

1.選擇的介質(zhì)不合適

確定選擇的介質(zhì)是否合適

2.柱效差

測定柱效

3.上樣量過大

優(yōu)化最佳的上樣量

4.流速過快

優(yōu)化最佳的流速

5.分離柱中微生物生長

更換介質(zhì)

液流較慢

1.蛋白或脂類聚集

及時清洗介質(zhì)或濾膜

2.蛋白沉淀在介質(zhì)中

調(diào)整平衡液和洗脫液組分,以維持目標物的穩(wěn)定性和介質(zhì)的結(jié)合效率

3.分離柱中微生物生長

所用試劑必須經(jīng)過過濾和脫氣,樣品上柱前必須離心或過濾

 

8.訂購信息

表3:訂購信息表

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號

Focurose 6FF

5ml

HN06030705M

Focurose 6FF

25ml

HN060307025M

Focurose 6FF

100ml

HN060307100M

Focurose 6FF

500ml

HN060307500M

Focurose 6FF

1L

HN060307001L

Focurose 6FF

10L

HN060307010L

 Focurose 6FF 20LHN060307020L


備注:大規(guī)格包裝產(chǎn)品或其它產(chǎn)品購買,請咨詢本公司當?shù)劁N售或售前技術(shù)支持。


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Focurose 6FF

Focurose 6FF

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Focurose 6FF

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